蒼鷺養(yǎng)殖如何控制沙門菌病?用什么藥好【藥敏試驗(yàn)一】
沙門菌病(Salmonellosis)是由沙門菌屬中的一種和幾種致病沙門菌(Salmonella)引起的人和多種動物感染的急性和慢性疾病的總稱,是公共衛(wèi)生學(xué)上具有重要意義的人畜共患病之一。美國總統(tǒng)奧巴馬支持了歐洲食品安全局的觀點(diǎn),認(rèn)為沙門菌是引起人類食源性傳染病的重要原因,而農(nóng)場飼養(yǎng)的動物和動物源性食品是人類沙門菌病的重要傳染源。蒼鷺(Ardea cinerea)屬鸛形目,鷺科、鷺屬,是一種中型涉禽,在遼寧為夏候鳥。養(yǎng)殖戶由于缺乏珍禽養(yǎng)殖技術(shù)造成重大經(jīng)濟(jì)損失。2001年4月江西省九江市鄱陽湖地區(qū)某規(guī)模在1 500只左右的蒼鷺養(yǎng)殖場,每天死亡蒼鷺30只左右,日齡在15日齡到20日齡,并且死亡數(shù)量呈遞增趨勢,本實(shí)驗(yàn)室對送檢的10只患病蒼鷺進(jìn)行系統(tǒng)診斷,確定為沙門菌所致。
1試驗(yàn)材料與方法
1.1材料
1.1.1儀器高壓滅菌器、恒溫培養(yǎng)箱、顯微鏡、搖床、冰箱。
1.1.2培養(yǎng)基普通肉湯液體培養(yǎng)基,S.S.瓊脂培養(yǎng)基,麥康凱瓊脂培養(yǎng)基,8%兔鮮血脫纖維瓊脂培養(yǎng)基。培養(yǎng)基均為江西農(nóng)業(yè)大學(xué)動物科技學(xué)院預(yù)防獸醫(yī)實(shí)驗(yàn)室自配,并檢驗(yàn)合格。
1.1.3藥敏紙片環(huán)丙沙星、左氧氟沙星、青霉素G、四環(huán)素、紅霉素、甲氧芐啶、頭孢曲松、林可霉素、阿米卡星頭孢唑林、氧氟沙星、利福平、哌拉西林、多黏菌素B、壯觀霉素、頭孢拉定、卡那霉素、呋喃唑酮、氨芐青霉素、強(qiáng)力霉素、慶大霉素。藥敏紙片直接均為6mm左右,以上藥敏紙片,購自杭州天和微生物試劑有限公司。
1.1.4微量生化管硫化氫、肌醇、水楊苷、枸櫞酸、葡萄糖、甘露醇、側(cè)金花、硝酸鹽、蔗糖、精氨酸、V-P、七葉苷、阿拉伯糖、麥芽糖、乳糖、鳥氨酸。以上微量生化管,購自杭州天和微生物試劑有限公司。
1.1.5試驗(yàn)動物6周齡雌性昆明系小鼠5只,購自南昌大學(xué)實(shí)驗(yàn)動物部。
1.2試驗(yàn)方法與步驟
1.2.1病料采集
送檢的病蒼鷺進(jìn)行查看,觀察到蒼鷺肛門下方羽毛都被白色糞便糊住,拉稀很嚴(yán)重,剖檢后仔細(xì)查看病理變化,發(fā)現(xiàn)所有剖檢的病例都存在肝臟腫大,出血嚴(yán)重,脾臟腫大,腸道漿膜出血,肌胃與腺胃交界處片狀出血非常嚴(yán)重。挑取病變最典型的肝臟進(jìn)行細(xì)菌分離。并且做好記錄,拍照留底。
1.2.2細(xì)菌分離及純化
剖檢后采取肝臟用劃線接種法接種于8%兔鮮血脫纖維瓊脂培養(yǎng)基上,置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)12~24h,進(jìn)行革蘭染色、鏡檢,觀察細(xì)菌形態(tài)。根據(jù)菌落形態(tài)及顯微鏡觀察結(jié)果,再挑取單個典型菌落劃線接種于8%兔鮮血脫纖維瓊脂平板37℃進(jìn)行多次純化培養(yǎng)。
1.2.3初步鑒定
通過多次細(xì)菌分離純化后,挑取最典型的菌落進(jìn)行涂片、革蘭染色以及鏡檢,首先通過肉眼觀察培養(yǎng)基上細(xì)菌菌落形態(tài)、大小、透明度以及借助顯微鏡觀察細(xì)菌的特征。
1.2.4培養(yǎng)特性
觀察在純培養(yǎng)平板上挑取典型菌落用劃線接種法分別接種于S.S.瓊脂培養(yǎng)基、麥康凱瓊脂培養(yǎng)基置于37℃恒溫培養(yǎng)箱中,培養(yǎng)12~24h,觀察長出細(xì)菌的菌落形態(tài)以及在各種培養(yǎng)基上的生長情況。
1.2.5擴(kuò)大培養(yǎng)
將普通液體肉湯培養(yǎng)液分裝于10支高壓滅菌的試管中,挑取兔鮮血平板上分離純化后的單個菌落于液體培養(yǎng)基中,操作時注意無菌條件,接種完后把試管放進(jìn)搖床中進(jìn)行擴(kuò)大培養(yǎng),條件是37℃,200r/min,培養(yǎng)24h。
1.2.6試驗(yàn)動物攻毒
用擴(kuò)大培養(yǎng)的菌液進(jìn)行小鼠腹腔注射,兩只小鼠注射0.5mL,兩只小鼠注射0.2mL,1只小鼠注射0.5mL滅菌生理鹽水作為對照,攻毒時注意腹腔注射盡量避免把菌液注射到小鼠皮下,影響小鼠發(fā)病及死亡時間,做好染色標(biāo)記。
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