藥物檢測：目標(biāo)生長曲線確定孵育孔中對應(yīng)的濃度梯度
目前，通過透射光強(qiáng)的變化模擬細(xì)菌生長狀態(tài)的變化，從而判斷孵育孔內(nèi)藥物是否具有殺菌或抑菌效果。
但是將細(xì)菌樣本加入藥敏板多個孵育孔內(nèi)，由于藥敏板中每個孵育孔本體透光率不同從而引入誤差，再加上光學(xué)系統(tǒng)也不是同一個系統(tǒng)，會引入光強(qiáng)值讀取誤差；因此，會導(dǎo)致細(xì)菌樣本在多個孔內(nèi)的生長狀態(tài)接近，但是由于上述兩個原因疊加的誤差，也會得相差較大的透射光強(qiáng)數(shù)據(jù)，對于儀器的判讀標(biāo)準(zhǔn)的制定是非常不利的，從而影響了藥敏測試的準(zhǔn)確性。
因此，亟需一種藥敏檢測方法，能夠有效提高藥敏測試的準(zhǔn)確性。
藥敏檢測方法包括以下步驟：
獲取藥敏板各孵育孔的初始透射光強(qiáng)值，各所述孵育孔內(nèi)有不同種類和/或不同濃度梯度的藥物。
應(yīng)理解的是，在獲取藥敏板各孵育孔的初始透射光強(qiáng)值之前，還包括將細(xì)菌樣本和培養(yǎng)基接種于藥敏板的多個孵育孔。
在具體實(shí)現(xiàn)中，可以從待測臨床樣品平板上挑取單菌落作為細(xì)菌樣本；將所述細(xì)菌樣本接種于培養(yǎng)基中獲得培養(yǎng)基混合液，并將所述培養(yǎng)基混合液接種于藥敏板的多個孵育孔。
需要說明的是，將細(xì)菌樣本和培養(yǎng)基接種于藥敏板的多個孵育孔可以是通過人工操作的方式、獨(dú)立裝置點(diǎn)樣的方式或集成式點(diǎn)樣的方式，也可以是其他接種方式，本實(shí)施例對此不加以限制。
需要說明的是，細(xì)菌等微生物感染會引發(fā)多種疾病，不僅發(fā)病率高而且經(jīng)常引發(fā)危重癥，嚴(yán)重危害人類健康和生命。因此，研究各類微生物感染疾病對應(yīng)濃度梯度的抑菌或殺菌藥物是臨床醫(yī)學(xué)領(lǐng)域的重要問題。
可理解的是，在相關(guān)技術(shù)中，針對細(xì)菌等微生物的檢測任務(wù)包括有臨床藥敏檢測，臨床藥敏檢測是為了檢測抗菌藥物的MIC(MinimumInhibitoryConcentration，最低抑菌濃度)值，該數(shù)據(jù)有助于改善患者的預(yù)后和防止耐藥性微生物菌株的演變。確定最低抑菌濃度值，需要對微生物進(jìn)行準(zhǔn)確有效的計數(shù)。以細(xì)菌為例，傳統(tǒng)的細(xì)菌計數(shù)方法包括比濁法、菌落計數(shù)法、計數(shù)器測定法等。
其中，比濁法是根據(jù)菌懸液的透光量間接地測定細(xì)菌的數(shù)量，細(xì)菌懸浮液的濃度在一定范圍內(nèi)于透光度成反比，與光密度成正比，此方法簡單快捷。本實(shí)施例就是通過透射光強(qiáng)的變化模擬細(xì)菌等微生物的生長狀態(tài)的變化，從而判斷孵育孔內(nèi)對應(yīng)濃度梯度的藥物是否具有殺菌或抑菌效果，從而指導(dǎo)用藥。
應(yīng)理解的是，上述藥敏板是用來做藥敏實(shí)驗(yàn)或者抗菌實(shí)驗(yàn)的瓊脂平板。
在具體實(shí)現(xiàn)中，可以從待測臨床樣品平板上挑取單菌落作為細(xì)菌樣本；將所述細(xì)菌樣本接種于培養(yǎng)基中獲得培養(yǎng)基混合液，并將所述培養(yǎng)基混合液接種于藥敏板的多個孵育孔，所述孵育孔內(nèi)有不同種類和不同濃度梯度的藥物。
需要說明的是，所述培養(yǎng)基選自BBL(美國BD公司)、Difco(美國BD公司)、Mueller-Hinton Broth(英國Oxoid公司)和Iso Sensitest肉湯(英國Oxoid公司)中的至少一種。
所述培養(yǎng)基具體為2×BBL培養(yǎng)基(美國BD公司)、2×Difco(美國BD公司)、2×Mueller-Hinton Broth(英國Oxoid公司)和2×Iso Sensitest肉湯(英國Oxoid公司)中的至少一種。
在現(xiàn)有技術(shù)中將細(xì)菌樣本加入藥敏板多個孵育孔內(nèi)，每個孵育孔本體透光率不同引入誤差，再加上光學(xué)系統(tǒng)也不是同一個系統(tǒng)，也引入光強(qiáng)值讀取誤差；即便細(xì)菌樣本在多個孵育孔內(nèi)生長狀態(tài)接近，由于以上兩個原因疊加的誤差，也會得相差較大的透射光強(qiáng)數(shù)據(jù)。
例如，以兩個孔對應(yīng)兩套光學(xué)系統(tǒng)為例，假設(shè)兩個孔的透光率分別為0.8，0.4，兩套光學(xué)系統(tǒng)原始光強(qiáng)分別為1000，800；孵育孔內(nèi)待檢測液的透光率4個時刻的變化值為0.9、0.8、0.6、0.3；那么對應(yīng)第一組孔與第一套光學(xué)系統(tǒng)得到的光強(qiáng)值變化為1000*0.8*0.9＝720、1000*0.8*0.8＝640、1000*0.8*0.6＝480、1000*0.8*0.3＝240；對應(yīng)第二組孔與第二套光學(xué)系統(tǒng)得到的光強(qiáng)變化為800*0.4*0.9＝288、800*0.4*0.8＝256、800*0.4*0.6＝192、800*0.4*0.3＝96。根據(jù)上述兩組數(shù)據(jù)同樣的樣本生長趨勢，得到了兩個完全不同的生長曲線，對于儀器的判讀標(biāo)準(zhǔn)的制定是非常不利的，從而影響了藥敏測試的準(zhǔn)確性。
目標(biāo)生長曲線；基于各所述目標(biāo)生長曲線確定各所述孵育孔中對應(yīng)的濃度梯度的藥物的效果。由于本實(shí)施例將藥敏板放入孵育系統(tǒng)后，在預(yù)設(shè)時間內(nèi)基于第二時間間隔依次獲取各孵育孔的透射光強(qiáng)值；根據(jù)各透射光強(qiáng)值確定各孵育孔的初始透射光強(qiáng)值，初始透射光強(qiáng)值為所述透射光強(qiáng)值的最大值、最小值或平均值；然后基于各所述孵育孔對應(yīng)的初始透射光強(qiáng)值和對照透射光強(qiáng)值，通過預(yù)設(shè)操作生成細(xì)菌樣本的目標(biāo)生長曲線，最后基于各目標(biāo)生長曲線確定各孵育孔中對應(yīng)的濃度梯度的藥物的效果，相比于現(xiàn)有技術(shù)，本實(shí)施例可以有效降低檢測過程中偶然性帶來的偏差，進(jìn)一步提高了藥敏檢測的準(zhǔn)確性。
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