?刺糖多孢菌生長(zhǎng)曲線的測(cè)定與最佳培養(yǎng)溫度
刺糖多孢菌(Saccharopolyspora spinosa)屬糖多孢菌屬，是一種好氧型革蘭氏陽(yáng)性的非抗酸性放線菌，其有氧發(fā)酵可產(chǎn)生次級(jí)代謝產(chǎn)物多殺菌素。多殺菌素是一種新型高效的生物殺蟲(chóng)劑，主要用于農(nóng)林蟲(chóng)害、儲(chǔ)糧蟲(chóng)害、衛(wèi)生蟲(chóng)害、牲畜寄生蟲(chóng)害的防治，其產(chǎn)品目前主要用在棉花、果蔬、茶葉、煙草、中草藥、糧食等作物上。
將試驗(yàn)菌種接種于新鮮斜面培養(yǎng)基中，29℃培養(yǎng)7 d，用無(wú)菌水制備成數(shù)量級(jí)為108個(gè)/mL的孢子懸液，按1%接種量接入種子培養(yǎng)基，于29℃搖床培養(yǎng)7 d。搖瓶裝液量為30 mL/250 mL，玻璃珠6個(gè)，搖床轉(zhuǎn)速為240 r/min，偏心距為26 mm。每12 h取樣，測(cè)定樣品的生物量和pH，以上試驗(yàn)設(shè)3次重復(fù)。
測(cè)定結(jié)果
圖1刺糖多孢菌的生長(zhǎng)曲線
刺糖多孢菌C3－10－4的生長(zhǎng)曲線見(jiàn)圖1。從圖1中可以看出，菌株在生長(zhǎng)36 h后進(jìn)入對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，72 h后進(jìn)入平穩(wěn)期。pH呈現(xiàn)穩(wěn)步增長(zhǎng)的趨勢(shì)，變化范圍從pH 6.9到8.9，當(dāng)pH＞8.7時(shí)，菌絲體出現(xiàn)斷裂，開(kāi)始自溶。pH是影響菌株體內(nèi)各種酶活性的重要因素，pH的變化會(huì)引起酶活力的改變，從而影響菌株在培養(yǎng)過(guò)程中的代謝速度，甚至改變其代謝途徑和細(xì)胞結(jié)構(gòu)［18］。菌絲繁殖到一定程度后，由于養(yǎng)分的耗盡以及代謝產(chǎn)物的積累，菌體量不再增加，菌絲體逐漸老化，工業(yè)發(fā)酵生產(chǎn)中，要選擇菌體處在生命力極為旺盛的對(duì)數(shù)生長(zhǎng)期，且培養(yǎng)液的菌體量未達(dá)到高峰的時(shí)期作為移種時(shí)間。從生長(zhǎng)曲線來(lái)看，刺糖多孢菌最適種齡在60～70 h為宜。
小結(jié)：
種子的質(zhì)量是發(fā)酵能否正常進(jìn)行的重要因素之一，通過(guò)對(duì)刺糖多孢菌種子培養(yǎng)基的篩選與研究，確定其最佳培養(yǎng)溫度29℃、搖床轉(zhuǎn)速240 r/min、玻璃珠個(gè)數(shù)6個(gè)、搖瓶裝液量30 mL/250 mL。利用Gompertz方程對(duì)生長(zhǎng)曲線進(jìn)行擬合，得到擬合曲線方程為:X=8.420exp［－exp(2.183－0.057 5t)］
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