水體毒性的檢測方法與操作步驟
隨著人們的生產(chǎn)生活，大量的化學品進入水體，成為水體污染的主要污染源，這些污染物會對水體中的生物造成影響，同時也會危害到人體的健康，因此，對水體毒性進行檢測及監(jiān)測是評價水體是否收到污染以及判斷污染程度的重要手段。
在水體毒性的檢測方法中，生物檢測具有結(jié)果直觀的顯著優(yōu)勢，而被廣泛應(yīng)用。其中，慢性細胞毒性檢測方法通過將濃縮有機物暴露在哺乳動物細胞中培養(yǎng)72小時，對其慢性細胞毒性特性進行分析，根據(jù)實驗數(shù)據(jù)生成每個細胞毒性濃度響應(yīng)曲線，對曲線進行回歸分析計算出細胞密度降低50％相關(guān)的濃度因子(LC50)，以LC50作為衡量毒性大小的參數(shù)。但是，慢性細胞毒性檢測方法需要將同種水樣的濃縮有機物按從低到高的濃度暴露在細胞中培養(yǎng)72小時，消耗實驗細胞多，耗時可達數(shù)日，很難滿足對多組水樣毒性強度大小的快速檢測要求，生產(chǎn)效率較低。
因此，開發(fā)一種簡便且快速的水體毒性檢測方法具有重要意義。
這種水體毒性的檢測方法，包括以下步驟：
(1)測定待測水樣中的總有機碳濃度，酸化，濃縮，得濃縮后有機物；
(2)將步驟(1)所得濃縮后有機物加入細胞培養(yǎng)液中，進行細胞培養(yǎng)，測定培養(yǎng)過程中的細胞存活率；當所述待測水樣中的總有機碳濃度≥5mg/L時，所述細胞培養(yǎng)液中，所述濃縮后有機物的濃度為待測水樣中的總有機碳濃度的100-150倍；當所述待測水樣中的總有機碳濃度＜5mg/L時，所述細胞培養(yǎng)液中，所述濃縮后有機物的濃度為待測水樣中的總有機碳濃度的400-600倍；
(3)用Logistics函數(shù)擬合，得到細胞存活率與培養(yǎng)時間的擬合曲線，通過擬合曲線上驟降段的下降高度，評估待測水樣毒性。
本檢測方法以高濃度暴露為手段，將高濃度的有機物加入到細胞培養(yǎng)液中，能夠在短時間內(nèi)觀察到細胞的衰亡，從而實現(xiàn)短時間內(nèi)量化細胞死亡率，以細胞存活率為縱軸、培養(yǎng)時間為橫軸作散點圖，通過Logistics對細胞生長曲線進行擬合，通過擬合曲線上驟降段的下降高度，評估水樣毒性，下降高度越大，毒性越強，并且可以以此來比較不同水體的毒性強弱。
若水樣總有機碳濃度較低(＆lt;5mg/L)，則選擇原水濃縮倍數(shù)較高(400倍-600倍)的濃縮有機物；若水樣總有機碳濃度較高(≥5mg/L)，則選擇原水濃縮倍數(shù)較低(100倍-150倍)的濃縮有機物。以上參數(shù)的選擇，是經(jīng)過多次預(yù)實驗試驗出能使細胞在較短時間衰亡的有機物濃縮倍數(shù)。所檢測的水體毒性大小排序與傳統(tǒng)慢性哺乳動物毒性試驗結(jié)果一致，表明水體毒性檢測方法具有一定準確性，并且此方法可以在9小時內(nèi)完成曲線擬合，更加快速高效，能夠?qū)z測時間縮短，較快地比較水樣毒性大小，解決傳統(tǒng)慢性細胞毒性方法耗時長的弊端，提高生產(chǎn)效率。
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