泰樂菌素降解菌生長曲線測定：活菌計數(shù)法、比濁法、電導率法哪個更準確
本文以早期分離篩選的泰樂菌素降解菌——無丙二酸檸檬酸桿菌（Ｃｉｔｒｏｂａｃｔｅｒａｍａｌｏｎａｔｉｃｕｓ）為材料，繪制該菌生長曲線，為研究該菌的形態(tài)學特征、適應性及泰樂菌素降解機理提供其生長量參數(shù)。
泰樂菌素降解菌生長曲線的測定步驟
取４８ｈ培養(yǎng)后的泰樂菌素降解菌種子液，將種子液按１０％的接種量培養(yǎng)，分別在８～７２ｈ中，間隔８ｈ取樣。用活菌計數(shù)法測量培養(yǎng)基中細菌濃度，同時以１２１℃，滅菌２０ｍｉｎ的ＹＰＤ培養(yǎng)基為對照，采用比濁法測定菌液濃度，重復３次，計算平均值；分別在８～７２ｈ間，每間隔４ｈ取菌液１ｍＬ，加入裝有３０ｍＬ去離子水的試管中，同上條件超聲處理，取細胞破碎后的菌液５．０ｍＬ，用ＤＤ－１２Ａ型電導率儀測定電導率值，每個樣品測定３次，計算平均值。繪制泰樂菌素降解菌培養(yǎng)時間與Ｉｎ（ｃｆｕ／ｍＬ）以及ＯＤ５００ｎｍ和電導率值的生長曲線。
泰樂菌素降解菌的生長曲線
分別采用活菌稀釋計數(shù)法、電導率法和比濁法對泰樂菌素降解菌的生長曲線進行測定，結果如圖１，圖２所示。活菌稀釋計數(shù)法測定的降解菌生長曲線符合細菌生長的各個階段：０～８ｈ為降解菌生長的延遲期，８～２４ｈ為對數(shù)生長期，２４～５６ｈ為穩(wěn)定期，５６～７２ｈ為衰亡期。電導率法測定的生長曲線也有明顯的延遲期、對數(shù)生長期和穩(wěn)定期，且延遲期和對數(shù)生長期的時間范圍和活菌稀釋計數(shù)法相似，但此法所測到的穩(wěn)定期為２４～７２ｈ，無衰亡期。而分光光度法的生長曲線始終保持上升狀態(tài)，無明顯的延遲期、對數(shù)生長期、穩(wěn)定期和衰亡期。
由于菌體細胞的性狀特征和培養(yǎng)基組分影響，可采用電導率法來替代比濁法測定細菌的生長曲線和生長量。因為在菌體細胞含量較大時，在液體培養(yǎng)基中容易下沉，采用比濁法會存在一定誤差，另外，培養(yǎng)基的成分也會干擾細菌細胞的滲透情況，進而影響菌液的折射率以及渾濁程度。
綜上所述，采用電導率法能夠準確快速地測定泰樂菌素降解菌的生長量，該方法的建立將為篩選泰樂菌素藥渣中的降解菌株提供較好的評價方法。