E-test法多黏菌素藥敏條用于臨床腸桿菌科體外藥敏檢測(cè)（二）
2.3不一致結(jié)果分析
兩種方法MIC值超過(guò)|±1|個(gè)稀釋倍數(shù)的36株，測(cè)定MIC值見(jiàn)表3所示，相關(guān)性分析：P=0.012＜0.05，說(shuō)明藥敏條檢測(cè)結(jié)果與微量稀釋法檢測(cè)結(jié)果具有顯著的線性相關(guān)。配對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果中的P＞0.05，說(shuō)明兩者結(jié)果差異不明顯。
表2兩種方法所測(cè)MIC值EA結(jié)果
2.4不同類間分析
針對(duì)887株腸桿菌科細(xì)菌按照不同種屬分類，計(jì)算其EA一致性，埃希菌屬的EA為95.77%(317/331)，克雷伯菌屬的EA為96.14%(199/207)，沙門(mén)菌屬的EA為97.09%(100/103)，志賀菌屬的EA為96.43%(108/112)，其他屬腸桿菌的EA為94.03%(126/134)，并對(duì)這5種進(jìn)行顯著性差異分析，結(jié)果見(jiàn)表4所示。
3討論
目前，體外抗菌藥物敏感性試驗(yàn)技術(shù)主要包括紙片擴(kuò)散法、微量肉湯稀釋法、商品化全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)(如Vitek-Compact,BD Phoenix)和E-test法等。其中，紙片擴(kuò)散法操作簡(jiǎn)單、對(duì)實(shí)驗(yàn)室要求較低，且花費(fèi)較低，適合臨床實(shí)驗(yàn)室尤其是基層醫(yī)院使用。微量肉湯稀釋法是美國(guó)臨床和實(shí)驗(yàn)室標(biāo)準(zhǔn)化協(xié)會(huì)(CLSI)推薦的參考方法，但該方法操作繁瑣，暫無(wú)全自動(dòng)系統(tǒng)出現(xiàn)，并且板卡抗菌劑種類固定，影響臨床推廣使用。商品化全自動(dòng)微生物分析系統(tǒng)使用方便，但價(jià)格較昂貴且需要特殊儀器設(shè)備、抗菌藥物選擇相對(duì)固定、測(cè)定濃度范圍較窄，故在常規(guī)應(yīng)用中存在一定局限性。E-test法則綜合了MIC法與紙片擴(kuò)散法的優(yōu)點(diǎn)，操作簡(jiǎn)單、可得到具體的MIC值、測(cè)定濃度范圍寬、可選擇的藥物較多等，近些年來(lái)逐漸受到了實(shí)驗(yàn)室的認(rèn)可。然而多黏菌素在瓊脂中不易擴(kuò)散導(dǎo)致該方法可靠性降低，2018版CLSI M100-S28中針對(duì)黏菌素(多黏菌素B)藥敏體外檢測(cè)新增備注說(shuō)明，針對(duì)銅綠假單胞菌和不動(dòng)桿菌建議采用的微量肉湯稀釋法，刪除紙片擴(kuò)散法和E-test法折點(diǎn)范圍，備注說(shuō)明，不建議采用紙片擴(kuò)散法和E-test法藥敏條。本研究參考指南，采用ATCC標(biāo)準(zhǔn)株進(jìn)行平行體外藥敏試驗(yàn)，ATCC菌株確保檢測(cè)的可溯源性，質(zhì)控菌株檢測(cè)結(jié)果均一致，即E符合率為100%，說(shuō)明了試驗(yàn)結(jié)果的有效性。
表3超過(guò)|±1|個(gè)稀釋倍數(shù)36株臨床菌株檢測(cè)MIC值
表4腸桿菌科不同屬檢測(cè)EA一致性分析
本研究對(duì)887株腸桿菌科細(xì)菌，分別采用微量肉湯稀釋法、E-test法進(jìn)行體外藥敏試驗(yàn)，測(cè)定抗菌藥物的MIC，并統(tǒng)計(jì)分析兩種方法檢測(cè)MIC的一致性。共計(jì)887株腸桿菌的比對(duì)中，有45株菌的MIC值超出了|±1|個(gè)稀釋倍數(shù)，經(jīng)復(fù)測(cè)確認(rèn)，有36株菌測(cè)定結(jié)果仍然不符合，即糾正后的EA%為95.94%(851/887)。統(tǒng)計(jì)學(xué)χ2方檢驗(yàn)，采用P＞0.05，二者無(wú)顯著性差異，針對(duì)復(fù)測(cè)后36株菌株的一致性超過(guò)±1個(gè)稀釋倍數(shù)，推測(cè)可能是方法學(xué)或菌株的差異所致，也可能與藥敏檢測(cè)所用MH培養(yǎng)基的pH值、組分差異有關(guān)。針對(duì)887株腸桿菌科細(xì)菌按照不同種屬分成5類進(jìn)行分析，EA值最高的為沙門(mén)菌屬的97.09%(100/103)，EA最低的為其他屬腸桿菌的94.03%(126/134)，并對(duì)這5種進(jìn)行顯著性差異分析，P=0.801＞0.05，美國(guó)食品藥品監(jiān)督管理局(FDA)標(biāo)準(zhǔn)中對(duì)藥敏檢測(cè)試劑性能評(píng)價(jià)要求與微量肉湯稀釋法比對(duì)大于90%，該研究中比對(duì)一致性均高于94%，說(shuō)明腸桿菌科細(xì)菌使用E-test法藥敏條試劑是性能滿足預(yù)期要求。針對(duì)36株臨床菌檢測(cè)MIC值，相關(guān)性分析：P=0.012＜0.05，說(shuō)明藥敏條檢測(cè)結(jié)果與微量稀釋法檢測(cè)結(jié)果具有顯著的線性相關(guān)，配對(duì)檢驗(yàn)結(jié)果中的P＞0.05，說(shuō)明兩者結(jié)果差異不明顯。
體外藥敏試驗(yàn)是臨床選擇抗菌藥物治療的重要參考依據(jù)，準(zhǔn)確的藥敏試驗(yàn)對(duì)臨床極為重要。目前全世界關(guān)于多黏菌素的E-test法耐藥值折點(diǎn)問(wèn)題仍無(wú)統(tǒng)一認(rèn)識(shí)，而多黏菌素將越來(lái)越廣泛地應(yīng)用于臨床多重耐藥革蘭陰性菌感染的治療。在本研究中，多黏菌素B藥敏條用于腸桿菌科檢測(cè)時(shí)，E-test法和微量稀釋法具有很高的一致性，說(shuō)明E-test法多黏菌素藥敏條可用于臨床腸桿菌科體外藥敏檢測(cè)。
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