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沼澤紅假單胞菌R1菌株的培養基配方、培養條件、生長量及影響因素(一)

來源:飼料工業 發布時間:2024-06-05 13:56:10 瀏覽:547 次

2.1.3沼澤紅假單胞菌R1培養基的優化


以甘油為碳源,氯化銨為氮源,磷酸氫二鉀為磷源,添加微量元素溶液、維生素溶液,設計正交試驗L16(45),試驗設計見表1,其培養基優化試驗結果見表2。由表2可知,對沼澤紅假單胞菌R1的生長的影響因素為C>B>D>A>E,因素C磷源磷酸氫二鉀為主要影響因素,其它依次為因素B氮源氯化銨、因素D復合微量元素、因素A碳源甘油、因素E復合維生素。其適宜的培養基配方為A2B2C3D1E3,即甘油1.0 g、氯化銨1.0 g、磷酸氫二鉀0.3 g、微量元素溶液0.05 ml、維生素溶液0.15 ml、蒸餾水1 000 ml。


2.2沼澤紅假單胞菌R1培養條件的優化



2.2.1接種量對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


沼澤紅假單胞菌R1分別按照體積比的2%、4%、6%、8%、10%接入液體菌種于優化后的培養基200 ml中,于30℃、40 W白熾燈距離20 cm處下靜置培養72 h,結果見圖3。由圖3可知,隨著接種量的增加,沼澤紅假單胞菌R1菌數OD660值不斷增加,當接種量為6%時達到最大值,再加大接種量則OD660值呈現逐步下降趨勢,分析原因可能為隨著接入沼澤紅假單胞菌菌數的增加造成培養基營養的匱乏造成的,其適宜的接種量為6%(V/V)。

圖3不同接種量對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


2.2.2初始pH值對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


分別調整優化后的培養基初始pH值至5.0、6.0、7.0、8.0、9.0,滅菌冷卻后,接入6%的沼澤紅假單胞菌R1液體菌種,于30℃、40 W白熾燈距離20 cm處照射靜置培養72 h,結果見圖4。由圖4可知,沼澤紅假單胞菌R1較適宜的pH值范圍為6.0~8.0,pH值7.0時達到最大值,偏酸、偏堿均不利于其生長。

圖4不同pH值對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


2.2.3溫度對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


將優化后的培養基初始pH值調整為7.0,滅菌冷卻后,接入6%的沼澤紅假單胞菌R1液體菌種,分別置于培養溫度25、30、35、40℃,40 W白熾燈距離20 cm處靜置培養72 h,結果見圖5。由圖5可知,沼澤紅假單胞菌R1在設置的溫度下均能生長,較適宜的培養溫度為30~35℃,30℃時達到最大值,40℃時菌數OD660值下降較多。


2.2.4光照強度對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


將優化后的培養基初始調整為pH值7.0,滅菌冷卻后,接入6%的沼澤紅假單胞菌R1液體菌種,30℃,分別置于25、40、60、100 W白熾燈下距離20 cm處照射靜置培養72 h,結果見圖6。由圖6可知,較適宜的為40 W白熾燈下照射,隨著白熾燈功率W的增大,菌數OD660值明顯下降,分析原因可能為沼澤紅假單胞菌R1不需要較強的光照強度。

圖5不同溫度對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響

圖6不同光照強度對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


2.2.5裝液量對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


初始pH值7.0,具塞磨口250 ml三角瓶中分別裝入優化后液體培養基50、100、150、200 ml,滅菌冷卻后,接入6%的沼澤紅假單胞菌R1液體菌種,30℃、置于40 W白熾燈下距離20 cm處照射靜置培養72 h,結果見圖7。由圖7可知,250 ml三角瓶中裝入50 ml液體培養基中測定的菌數OD660值最大,隨著裝液量的增加,菌數OD660值呈下降趨勢。分析原因可能為在少量氧氣存在的情況下,沼澤紅假單胞菌R1生長更好一些,少量氧氣可以促進沼澤紅假單胞菌R1的生長。

圖7不同裝液量對沼澤紅假單胞菌R1生長的影響


2.2.6最佳培養條件的確定


優化后的液體培養基調整初始pH值7.0,250 ml三角瓶中裝入50 ml培養基,接種量為6%(V/V),30℃、置于40 W白熾燈下距離20 cm處照射靜置培養7 d,沼澤紅假單胞菌R1菌數OD660值可達2.066,經雙層平板計數法檢測沼澤紅假單胞菌R1菌數可達5.6×108個/ml。


3結論


①根據生產實際需要,經優化后沼澤紅假單胞菌R1其適宜的培養基配方為:甘油1.0 g、氯化銨1.0 g、磷酸氫二鉀0.3 g、微量元素溶液0.05 ml、維生素溶液0.15 ml、蒸餾水1 000 ml。


②經優化后沼澤紅假單胞菌R1其適宜的培養條件為:初始pH值7.0、培養溫度30℃、接種量為6%、裝液量為液體培養基50 ml/250 ml三角瓶、40 W白熾燈下距離20 cm處照射靜置培養。


③采取以上適宜的培養基、培養條件下進行培養,沼澤紅假單胞菌R1菌數OD660值可達2.066,經雙層平板計數法檢測沼澤紅假單胞菌R1菌數可達5.6×108個/ml。


沼澤紅假單胞菌R1菌株的培養基配方、培養條件、生長量及影響因素(一)

沼澤紅假單胞菌R1菌株的培養基配方、培養條件、生長量及影響因素(二)

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