忍冬提取液對酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌生長曲線、細(xì)胞形態(tài)和生物膜形成能力的影響（一）
酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌（Alicyclobacillus acidoterrestris）、單增李斯特菌（Listeria monocytogenes）和金黃色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）等細(xì)菌在自然環(huán)境中廣泛存在，是最常見的致病微生物，食用被這些細(xì)菌污染的食品后可能會引起嘔吐和中毒等不良癥狀，所以在食品加工和儲藏過程中常常要用化學(xué)防腐劑抑制有害微生物的生長。目前，工業(yè)生產(chǎn)中常用苯甲酸、檸檬酸和山梨酸等防腐劑，然而化學(xué)防腐劑亂用或濫用可能會對人體造成不同程度的危害。因此，迫切需要開發(fā)安全且有效的新型天然防腐劑。據(jù)文獻(xiàn)報道，植物中存在促進(jìn)人體健康且具有抑菌和殺菌作用的天然活性成分，如多酚、黃酮類和有機(jī)酸等。因此，尋找和利用有效抑菌成分含量豐富的植物具有重要意義。
忍冬（Lonicera japonica Thunb.）為忍冬科忍冬屬半常綠藤木，其干燥花蕾或帶初開的花為金銀花。國內(nèi)外研究證實，金銀花、忍冬葉和忍冬藤均含有黃酮類、有機(jī)酸類、揮發(fā)油類和環(huán)烯醚萜類等多種天然活性成分，具有抗菌消炎、清熱解毒、抗氧化、保肝利膽和降血糖等作用。Li等研究發(fā)現(xiàn)，金銀花中的酚酸和黃酮類化合物等活性成分可在不同程度上抑制金黃色葡萄球菌、大腸桿菌（Escherichia coli）和銅綠假單胞菌（Pseudomonas aeruginosa）。Rahman等研究了忍冬葉提取物和金銀花精油對體外食源性細(xì)菌的抑菌作用，結(jié)果表明忍冬葉對金黃色葡萄球菌的抑菌活性更強。馬艷妮等研究了忍冬葉總黃酮對金黃色葡萄球菌、大腸桿菌和鼠傷寒沙門氏菌（Salmonella typhimurium）等9種常見病原菌的體外抑菌活性，結(jié)果表明忍冬葉總黃酮具有較好的抗菌活性。但忍冬在抑制酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌作用等抑菌活性方面鮮有報道。
忍冬葉和忍冬藤的產(chǎn)量遠(yuǎn)高于金銀花。然而，目前對忍冬葉和忍冬藤的開發(fā)利用較少。因此，研究忍冬不同部位生物活性成分及功能特性，對提高忍冬的綜合利用價值具有重要意義。本文以金銀花、忍冬葉和忍冬藤為原料，研究忍冬不同部位生物活性成分及對12株供試菌的體外抑菌活性，并測定對抑制酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌效果較強的金銀花和忍冬葉提取液的最小抑菌濃度（MIC）和最小殺菌濃度（MBC）以及對金銀花和忍冬葉提取液對酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌生長曲線、細(xì)胞形態(tài)和生物膜形成能力的影響進(jìn)行研究。本研究為進(jìn)一步開發(fā)利用忍冬，開發(fā)新型食品抑菌劑提供參考。
1.材料與方法
1.1材料與儀器
金銀花、忍冬葉和忍冬藤來自河南省新鄉(xiāng)市河南科技學(xué)院金銀花試驗基地；嗜酸乳桿菌（L.acidophilus zrx02 GenBank No.MF804413）、植物乳桿菌（L.plantarum zrx03 GenBank No.MN784485）、鼠李糖乳桿菌（L.rhamnosus zrx01 GenBank No.KY348290、酸土脂環(huán)酸芽孢桿菌（A.acidoterrestris DSM 3922T）、無乳鏈球菌（S.agalactiae CICC 10465）、單增李斯特氏菌（L.monocytogenes CICC 21633）、金黃色葡萄球菌（S.aureus ATCC 25923）、枯草芽孢桿菌（B.subtilis CICC 10002）、大腸桿菌（E.coli JM109 ATCC 67387）、沙門氏桿菌（Salmonella CMCC 541）、空腸彎曲桿菌（C.jejuni CICC 22936）、馬克斯克魯維酵母（K.marxianus）均為河南科技學(xué)院食品研究所保藏菌株；MRS肉湯培養(yǎng)基、AAM培養(yǎng)基、BHI培養(yǎng)基、牛肉膏蛋白胨培養(yǎng)基、LB培養(yǎng)基、布氏肉湯培養(yǎng)基、YPD培養(yǎng)基青島高科技工業(yè)園區(qū)海博生物技術(shù)有限公司；沒食子酸成都曼斯特有限公司；蘆丁、福林酚、結(jié)晶紫北京索萊寶有限公司；綠原酸美國Sigma-Aldrich公司；戊二醛天津市科密歐化學(xué)試劑有限公司；甲酸、甲醇色譜純，西隴科學(xué)股份有限公司；其他試劑均為分析純。
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